Uputstvo za uzorkovanje i dostavljanje uzoraka

Priprema pacijenta

Za većinu biohemijskih ispitivanja pasa i mačaka, kada kliničko stanje pacijenta to dozvoljava, preporučuje se 8–12 sati bez hrane. Voda može biti dostupna.

Kod hitnih pacijenata, hematoloških ispitivanja i određenih specifičnih analiza uzorkovanje posle perioda bez hrane nije neophodno. Ukoliko je pacijent neposredno pre uzorkovanja uzimao hranu, preporučljivo je to navesti u zahtevu za ispitivanje.

Venepunkcija

Koristite iglu odgovarajućeg promera i izbegavajte:

• prekomeran negativni pritisak tokom aspiracije;
• dugotrajnu vensku stazu;
• snažno istiskivanje krvi kroz iglu u epruvetu;
• intenzivno mućkanje uzorka.

Ovi faktori mogu doprineti hemolizi, aktivaciji trombocita, stvaranju mikrokoaguluma i drugim preanalitičkim promenama.

Epruvete sa citratom moraju biti napunjene do označene zapremine kako bi odnos krvi i antikoagulansa bio odgovarajući.

Mala količina uzorka

Neophodno je poštovati količinu navedenu za konkretnu analizu.

Kod veoma malih pacijenata ili ograničene količine uzorka kontaktirajte laboratoriju - često je moguće prilagoditi izbor analiza raspoloživoj zapremini.

Priprema seruma

Nakon uzorkovanja, krv namenjenu za serum ostaviti da potpuno koaguliše, najčešće 20–30 minuta na sobnoj temperaturi, a zatim centrifugirati.

Preporučuje se centrifugiranje približno 1700–2000 ×g tokom 10 minuta, odnosno u skladu sa preporukama proizvođača epruvete i centrifuge.

Relativna centrifugalna sila (×g, RCF) je precizniji način definisanja uslova centrifugiranja od broja obrtaja u minuti (rpm), jer odgovarajući rpm zavisi od prečnika rotora.

Nakon centrifugiranja serum treba odvojiti od ćelijske komponente što pre, naročito ako uzorak neće biti odmah analiziran.

Hemoliza i lipemija

Hemolizu treba svesti na minimum pravilnom tehnikom uzorkovanja, odgovarajućom iglom i pažljivim rukovanjem uzorkom.

Izražena hemoliza, lipemija ili ikterus mogu uticati na rezultate pojedinih analiza. Laboratorija će ove promene uzeti u obzir prilikom procene kvaliteta uzorka i interpretacije rezultata.

Cistocenteza

Cistocenteza je preferirani način uzorkovanja urina za bakteriološku kulturu, jer smanjuje mogućnost kontaminacije mikroorganizmima iz distalnog urinarnog i genitalnog trakta.

Za rutinsku analizu urina mogu se koristiti i drugi načini uzorkovanja. Način uzorkovanja obavezno navesti u zahtevu za ispitivanje, jer može uticati na interpretaciju sedimenta i mikrobiološkog nalaza.

Uzorak urina analizirati što pre. Ako analiza nije moguća ubrzo nakon uzorkovanja, urin čuvati na 2–8°C. Za optimalnu procenu sedimenta preporučuje se analiza u roku do približno 4 sata.

Slobodno mokrenje

Uzorak dobijen spontanim mokrenjem prihvatljiv je za rutinsku analizu urina. Kada je moguće, prikupiti srednji mlaz u čistu posudu.

Zbog moguće kontaminacije iz distalnog urinarnog i genitalnog trakta, način uzorkovanja mora biti poznat prilikom interpretacije sedimenta i naročito mikrobiološke kulture.

Kateterizacija

Uzorak se može prikupiti sterilnom kateterizacijom kada je to klinički opravdano. Početni deo urina može se odbaciti pre prikupljanja uzorka.

Kateterizacija povećava mogućnost kontaminacije u odnosu na cistocentezu, pa način uzorkovanja obavezno navesti u dokumentaciji.

Uzorkovanje

Dostaviti svež, reprezentativan uzorak fecesa u čistoj, dobro zatvorenoj posudi. Izbegavati kontaminaciju:

• zemljom;
• posipom;
• travom;
• podlogom;
• dezinfekcionim sredstvima.

Za većinu rutinskih koproloških pregleda dostaviti približno 5 g fecesa.

Parazitološko ispitivanje

Svež uzorak omogućava najbolju očuvanost parazitskih struktura. Ako uzorak nije moguće odmah poslati, čuvati ga na 2–8 °C, osim kada je za određeno ispitivanje navedeno drugačije.

Mikrobiološko ispitivanje fecesa

Za mikrobiološko ispitivanje dostaviti svež uzorak i navesti relevantne kliničke podatke, uključujući primenjenu antimikrobnu terapiju i sumnju na određeni infektivni agens, ukoliko postoji. Za pojedine enteropatogene mogu biti potrebni posebni uslovi uzorkovanja i transporta.

Aspiraciona biopsija tankom iglom – FNA

Za većinu citoloških uzoraka preporučuju se igle 21–25G. Izbor veličine igle zavisi od vrste, lokalizacije i konzistencije promene.

U zavisnosti od karakteristika lezije može se koristiti aspiraciona ili neaspiraciona (kapilarna) tehnika.

Materijal naneti na najmanje 2–4 čiste mikroskopske pločice i razmaz napraviti uz minimalan pritisak kako bi se izbeglo oštećenje ćelija.

Preparati treba da se potpuno osuše na vazduhu.

Otisak

Otisci su korisni kod ulcerisanih i egzofitičnih promena, kao i sa sveže presečene površine tkiva. Ako na površini postoji velika količina krvi ili tečnosti, nežno ukloniti višak upijajućim materijalom. Čistu pločicu zatim blago prisloniti na površinu promene. Ne trljati i ne pritiskati snažno. Preparat osušiti na vazduhu.

Tečnosti

Za citološki pregled telesnih tečnosti, kada količina uzorka to dozvoljava, poslati:

• EDTA epruvetu – za broj ćelija i citološku procenu
• sterilnu epruvetu bez aditiva – kada su potrebna dodatna biohemijska ili mikrobiološka ispitivanja

Preporučuje se da se odmah nakon uzorkovanja napravi i nekoliko direktnih razmaza, naročito kod uzoraka male celularnosti ili kada se očekuje odložen transport.

Obeležavanje i transport preparata

Preparati moraju biti jasno označeni. Ako se kod istog pacijenta uzorkuje više promena ili anatomskih lokalizacija, svaku pločicu ili grupu preparata označiti odgovarajućim mestom uzorkovanja.

Potpuno osušene mikroskopske pločice transportovati u čvrstoj kutiji za preparate, zaštićene od lomljenja i vlage.

Brisevi sa transportnom podlogom

Koristiti sterilni bris sa odgovarajućom transportnom podlogom.

Uzorak uzeti sa mesta aktivnog procesa uz izbegavanje kontaminacije okolnim tkivom. Za svaku anatomsku lokalizaciju koristiti poseban bris.

Uzorak dostaviti laboratoriji što pre. Kada je bris pravilno uzet i postavljen u odgovarajuću transportnu podlogu, preporučeni maksimalni period transporta je 48–72 sata, u zavisnosti od vrste uzorka i očekivanog mikroorganizma.

Do transporta uzorak čuvati u skladu sa preporukama za korišćenu transportnu podlogu.

Aspirati, tečnosti i tkivo

Materijal iz dubokih promena uzorkovati aseptično. Tkivo namenjeno mikrobiološkom ispitivanju dostaviti u sterilnoj, dobro zatvorenoj posudi, bez formalina i drugih fiksativa. Tečnosti i aspirate dostaviti u sterilnoj posudi ili odgovarajućem sterilnom zatvorenom sistemu.

Ne slati špriceve sa postavljenom iglom.

Urin za bakteriološku kulturu

Cistocenteza je preferirani način uzorkovanja urina za bakteriološku kulturu.

Kada cistocenteza nije moguća, može se koristiti sterilno uzorkovan kateterizovani urin, uz obavezno navođenje načina uzorkovanja zbog pravilne interpretacije rezultata.

Uzorak do transporta čuvati na 2–8°C i dostaviti laboratoriji što pre.

Identifikacija uzorka

Svaki uzorak mora biti jasno i nedvosmisleno obeležen. Potrebno je navesti najmanje:

• ime ili jedinstvenu identifikaciju pacijenta;
• vrstu životinje;
• vrstu uzorka ili anatomsku lokalizaciju, kada je relevantno;
• datum uzorkovanja.

Zahtev za ispitivanje

Zahtev za ispitivanje prijavite preko VetPro portala ili uz uzorak dostavite odgovarajući odštampani zahtev, koji možete popuniti ovde. Navedite:

• podatke o veterinaru i veterinarskoj organizaciji;
• identifikaciju pacijenta;
• vrstu, rasu, starost i pol kada su relevantni;
• vrstu uzorka;
• način uzorkovanja kada utiče na interpretaciju;
• datum uzorkovanja;
• tražena ispitivanja;
• relevantne kliničke podatke.

Klinički podaci

Klinički podaci mogu značajno unaprediti interpretaciju laboratorijskog nalaza. Posebno je korisno navesti razlog za ispitivanje i glavno kliničko pitanje. Kada su relevantni, navedite i:

• kliničke znake i njihovo trajanje;
• trenutnu terapiju;
• prethodnu antimikrobnu, kortikosteroidnu ili antiparazitsku terapiju;
• relevantne prethodne laboratorijske rezultate;
• nalaze dijagnostičkog imidžinga;
• prethodne značajne dijagnoze.

Opšta pravila

Ne postoji jedan režim transporta koji odgovara svim vrstama laboratorijskih uzoraka. Odgovarajuća temperatura i maksimalno vreme do obrade zavise od vrste uzorka i tražene analize.

Uzorak tokom transporta treba zaštititi od:

• prekomerne toplote;
• direktnog sunčevog zračenja;
• smrzavanja, osim kada je ono izričito zahtevano;
• prosipanja i lomljenja;
• međusobne kontaminacije različitih uzoraka.

Ako je za određeni uzorak potrebno hlađenje, čuvati i transportovati ga na 2–8 °C, bez direktnog kontakta epruvete ili posude sa zamrznutim rashladnim uloškom.

Citološke i hematološke preparate na mikroskopskim pločicama transportovati suve, na ambijentalnoj temperaturi i zaštićene od vlage i lomljenja.

Pakovanje

Uzorci moraju biti zapakovani tako da tokom uobičajenog transporta ne može doći do prosipanja, lomljenja ili kontaminacije. Za uzorke koji se klasifikuju kao UN 3373 – Biological Substance, Category B, primenjuje se odgovarajuće trostruko pakovanje:

Mikroskopske pločice zaštititi čvrstom kutijom i odvojiti od tečnih uzoraka.